一、在色譜前處理中，過濾的重要性
由于色譜系統(tǒng)的精密性和對結(jié)果分析的準確性要求，對樣品的過濾顯得尤為重要。
過濾可以保護色譜系統(tǒng)和色譜柱，延長柱子的使用壽命，改善數(shù)據(jù)的度。過濾可以消除由于摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動。可以消除由于存在氣泡對檢測系統(tǒng)的干擾。因此通常采用微孔濾膜來過濾流動相，使用針樣品過濾器來過濾樣品。
二、濾膜的相關(guān)參數(shù)及常識
1.孔徑：孔徑等級是指通過在十分嚴格的測試條件下100% 截留下某種特定尺寸的挑戰(zhàn)菌來區(qū)分孔徑。必須指明的條件里有：測試有機體（或分子）尺寸及濃度，測試壓力和檢測法。
2.空氣通量：為測量空氣通過濾器之一種方法。即在不同的壓力、不同的孔率和不同濾器面積情況下，空氣所流過的流量。
3.氣泡點：在微孔濾膜行業(yè)中，使用特定液體浸濕濾膜，并在特定溫度下，所須排擠出濾膜孔中液體的zui小壓力之稱。
4.過濾器功效：過濾器在其特定壓力下，以其過濾總量和阻礙微粒大小定義其過濾功效。一般來說，阻礙程度及壓力越低時，過濾器的功效越大。
5.濾材壽命：在特定操作條件下，過濾器的zui長使用時間。它取決于許多因素，例如過濾液的性質(zhì)、操作溫度、過濾材質(zhì)的選擇等。
6.親水性：親水性的濾膜通常有一層特殊化學(xué)層使得濾膜可以被水浸潤； 親水性 是對水的斥力的一個參考。疏水性濾膜很少吸水或*不吸水。在觀察上可目視小水液滴停留在濾膜的表面而不會被表面吸附而擴散成水面。疏水性的大小取決于濾材的孔徑和濾膜原料的特性。
7.流率和流量：流率是在特定溫度及壓力下單位時間內(nèi)過濾液通過濾膜的總量。流率與濾膜表面性質(zhì)有密切關(guān)系。流率和通量是濾材和設(shè)計性能的二個重要參數(shù)。這種性能取決于以下幾個方面：
1）粘性：粘度決定了液體流動的難易。液體的粘度越高（在一定的溫度和壓力條件下）流率越低。而要達到相同流率時所需的壓力越高。
2）壓力差：過濾中進口與出口的壓力差，當濾器的滿負荷時，過濾壓力差增大。
3）孔率：是指濾膜上所有孔的體積占全部濾膜體積的比例。通常濾膜有50-90% 孔面積，流率與膜的孔率有直接的關(guān)系。
三、選擇針樣品過濾器要考慮的因素
微孔濾膜的主要功能是從氣相或者液相中截留微粒，細菌及其他雜質(zhì)，以達到分離，凈化，提純的目的。因此選擇濾膜要考慮以下幾個因素：
1.濾膜的材質(zhì)（化學(xué)兼容性）：選擇濾膜時，首先要考慮化學(xué)相容性。濾器是否耐酸、堿、有機溶劑等。
2.濾膜的孔徑：對于使用3μm或更大粒徑填料的色譜柱系統(tǒng)，可采用0.45μm的針樣品過濾器或濾膜；對于使小于3μm填料的色譜系統(tǒng)，或涉及微生物生長的色譜系統(tǒng)，推薦使用0.2μm的濾膜。對于難處理的混濁溶液，可以使用1-5um的濾膜進行預(yù)過濾，然后再用相應(yīng)的濾膜進行續(xù)濾。
3.樣品的特性：
1）親水性樣品：選用親水膜片。對水有親和力，適合過濾水為基質(zhì)的溶液。可用的濾膜有：混合纖維素酯，聚醚砜（PEs），Nylon等。
2） 強腐蝕性有機溶劑：一般采用疏水性膜。如聚四氟乙烯膜（PTFE），聚丙烯（PP）等材質(zhì)的濾膜
3）蛋白溶液：選擇低蛋白吸附的濾膜，如聚偏氟乙烯膜（PVDF）。
4）離子色譜：通常認為聚醚砜（PEs）濾膜比較適合低無機離子的溶液的過濾。
4.選擇針樣品過濾器時，除了考慮上述因素外，還要考慮樣品的體積（即選擇什么規(guī)格的針樣品過濾器）：通常樣品量小于2ml時，選用4mm直徑的微型濾頭。樣品量在2-10ml之間，選用13mm直徑的濾頭；當樣品量大于10ml時，選用25mm直徑的濾頭。
|
